DNA分型技术实验流程 DNA typing

自从DNA被发现以来，人们通过研究拓展了DNA在各种领域的不同应用。其中DNA分型技术在法医物证鉴定领域的应用给法医界带来了一次革命性的改变。人体的DNA是由A,T,G和C四种碱基组成的，任意两个人之间大约99％的DNA序列是一样的，要区分两个人，就需要鉴定两个人那不同的1％的DNA。当然1％的DNA包含的遗传信息其实已经非常庞大了，我们不需要鉴定全部不一样的，只要鉴定一些容易的，足够区分两个人的DNA就行了。

一、样本制备
1、 一般采用FTA卡、棉签、胶带等载体对物证上的DNA进行采集并保存。
2、 使用核酸提取试剂盒和自动化提取仪器对样本进行DNA提取，主要的提取方法有chlex-100法、磁珠法、离心柱法。目前主流的试剂盒有AGOWA（LGC）、法医样本试剂盒（洛阳惠尔纳米），仪器有HR003核酸提取仪、HQIAcube等。

二、STR复合扩增
STR是Short Tandem Repeats的缩写，中文一般翻译成“短重复碱基序列”，不过大部分情况下都不翻译，直接用“STR”，简单明了。人的DNA中大约有15～20％的序列是重复性的碱基序列，顾名思义，STR是重复序列比较短的那种，通常是2～7个碱基，这种STR大概有3万个，也就是平均1万个碱基就能碰上这么个STR序列。从生物技术角度讲，长度为4的重复序列是最适合做位点的STR了。举个例子，比如在TH01这个位点上，一个人的序列可能是-AATG-AATG-AATG-，这儿出现了3个重复的的AATG，可以缩写成(AATG)3，而另外一个人可能是-AATG-AATG-AATG-AATG-，用专门的仪器，我们可以很容易的区分这两个不同的序列。也可能出现比较复杂的情况，比如VWA这个位点是TCTA(TCTG)3－4(TCTA)n。位点上等位基因的命名是根据重复序列出现的次数来确定的，出现了5次这个等位基因就叫“5”。复杂点的情况可能是“9.3”，意思就是9个重复序列加3个碱基，实际情况是(AATG)6ATG(AATG)3。
1、 常染色体位点和Y染色体位点的扩增。
2、 试剂盒：Identifiler Plus PCR扩增试剂盒（AB公司）、Yfiler PCR扩增试剂盒（AB公司）、Goldeneye 16A试剂盒（基点）、AGCU 10+1 STR荧光检测试剂盒（中德美联）等。

三、分型检测
仪器：3500系列基因分析仪（AB公司）

四、数据分析
利用GeneMapper软件对STR扩增后的产物进行分析，最终得到如下图的分析结果。图中展示了6个常染色体的位点和决定性别的位点Amel，图中所示样本为一个男性，Amel位点为XY，vWA位点为14和18两个等位基因，TPOX位点为两个相同的8。在此数据的基础上，可以进行嫌疑人的排查、亲子鉴定、罪犯锁定等。